第三节 自由基的主要检测方法

一、自由基的化学检测

用化学方法检测自由基比较困难，因为自由基很不稳定，无法分离。但是，可以用间接的方法证明自由基的存在。例如，甲苯的甲基氢比较活泼，容易被自由基夺氢而生成苄基自由基，后者很易通过自由基结合反应而变成二苯乙烷，就可以推知此反应中间物有自由基生成。

故分析一个反应产物，往往可以有助于判断一个反应过程是否涉及自由基。

加入自由基清除剂并观察反应变化是否受到影响，也是判断是否涉及自由基反应的简便方法。维生素C、维生素E就可以用作自由基清除剂，并常用于研究生物体系的一些变化是否涉及自由基反应。

二 、自由基的物理检测

电子自旋共振法（electron spin resonance，ESR）亦称电子顺磁共振法（electron paramagnetic resonance，EPR），可用于直接检测自由基。

三、生物化学发光检测

通过生物化学反应，是反应产物形成激发态，当激发态还原到基态时就会放出光子，释放出能量，这就产生化学发光现象。自由基一般都处在激发态，所以可以发射出光子，利用光电倍增原理，可以检测自由基的存在及其反应过程。并可利用荧光技术，结合光谱、液相色谱、流式细胞仪等手段进行分析检测。